保種服務
胚胎凍存
方法:將超排後的雌鼠與目的雄鼠進行交配,第二天取2細胞進行慢速冷凍,存放於液氮中。
優勢:慢速冷凍的胚胎復甦後成活率高(80%以上),且移植後的大小鼠懷孕率及產仔率高。
缺點:操作難度高,需要高昂的程序冷凍儀,操作時間達到6個小時。
胚胎復甦
目的:將凍存胚胎進行復甦、移植獲得所需的大小鼠 。
方法:將凍存的胚胎從液氮中取出,室溫解凍,放入相應的復甦液中進行復甦操作。將存活的卵移植入假孕母鼠體內,獲得所需要大小鼠。
精子凍存
方法:將雄鼠處死取出精子通過快速冷凍保存於液氮中
優勢:操作速度快,精子保存量大。
缺點:復甦時需要進行體外受精,且受精率低(一般為15%-25%)
精子復甦
目的:將凍存精子進行復甦獲得所需的大小鼠。
方法:將凍存的精子從液氮中取出放置於37度10分鐘後轉入TYH中進行精子獲能,獲能後的精子通過體外受精的方式獲得受精卵,移植入假孕母鼠體內,獲得所需要的大小鼠。
胚胎復甦
目的:將凍存胚胎進行復甦、移植獲得所需的大小鼠 。
方法:將凍存的胚胎從液氮中取出,室溫解凍,放入相應的復甦液中進行復甦操作。將存活的卵移植入假孕母鼠體內,獲得所需要大小鼠。
精子復甦
目的:將凍存精子進行復甦獲得所需的大小鼠。
方法:將凍存的精子從液氮中取出放置於37度10分鐘後轉入TYH中進行精子獲能,獲能後的精子通過體外受精的方式獲得受精卵,移植入假孕母鼠體內,獲得所需要的大小鼠。
熱門文章
Cre-ERT2在無Tamoxifen誘導的情況下,在細胞質內處於無活性狀態;當Tamoxifen誘導後,Tamoxifen的代謝產物4-OHT(雌激素類似物)與ERT結合,可使Cre-ERT2進核發揮Cre重組酶活性。
查看你一定聽說過Cre-lox重組系統,無論你是否直接進行過基因操作。由於Cre-lox系統具有操作簡單、重組率高的優點,如今已經成為體內外遺傳操作的強有力工具。利用Cre-lox系統,可以在特定細胞、組織或整個生物體,甚至在特定時間點敲除或表達某個基因,實現對特定基因的時空特異性操作,這對基因功能的研究和人類疾病動物模型的建立都具有深刻影響。
查看